榛果源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法

注意事項(xiàng)：產(chǎn)品僅用于科研1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：榛果源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法 
規(guī)格： 48T  0.2PCR管
貨號(hào)：BK-P97243
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
活性炭(凈水、氣體化,棒,φ4.0mm)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化,棒,φ4.0mm  RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

活性炭(藥物脫色,200目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：藥物脫色,200目  BCA蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒100/500  小鼠甲狀旁腺激素(PTH)試
甲基纖維素(4000 mPa.s)質(zhì)量規(guī)格：4000mPa.s,BRMethyl cellulose, middle viscosity  雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 96T/48T  Humancholesterol,CHELISA試劑盒人膽(CH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,酸性紅18質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant ponceau 5R  人3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)試劑盒 Human Pregnanediol-3-glucuronide,PdG ELISA kit  HumanEndostatin，ESELISAKit人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酚藏花紅質(zhì)量規(guī)格：>80%Phenosafranine  英文名稱MouseOsteopoin，OPNELISAkit小鼠OPN規(guī)格：96T/48T  牛細(xì)小病毒I型(PV-I)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

天狼星玫紅，BB質(zhì)量規(guī)格：ARSirius Rose BB  冰凍切片組織INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  人組織蛋白酶D(cath-D)試劑盒 Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit
CM-H099人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL改良CAMP-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：25毫升

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)人血纖維蛋白原 Fibrinogen from human plasma 9001-32-5 100MG 通用試劑

人癌細(xì)胞;MDA-MB-231 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL天仙子安相關(guān)物質(zhì)A HyoscycMinq Rqlctqd CoMpound c;NorhyoscycMinq Sulfctq 237-9-1

人肺泡上皮細(xì)胞cDNAHPAEpiC cDNAGUANIDINExy7noCHLORIDEW/OA鹽酸胍技術(shù)級(jí)5KG1950-1-1RT

SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (+/-)-BUTACLAMOL xy7noCHLORIDE
榛果源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) TRICINE三羥甲基甲基甘酸1克IND

人肝細(xì)胞RNAHH miRNA5 μg1-十二流醇 1-Dodqccnqthiol 11-22-0

大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106)M-TGE肉湯shēng huà shì jì容量：500毫升

荷蘭白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1錄化-2-羥基-3-(基)基聚環(huán)氧纖維素，英文名或英文縮寫：Polyquaternium-10，級(jí)別：IND，規(guī)格：25克

T739小鼠肺腺癌瘤株