真核生物18S核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法

注意事項：產品僅用于科研1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱：真核生物18S核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法 
規格： 48T  0.2PCR管
貨號：BK-P97215
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點優勢：
   1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
   2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
加拿大香脂質量規格：商品級Canada balsam  RabbitCollagenaseIELISA試劑盒兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規格：96T/48T  類白細胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒 ，英文名： HLA-E ELISA Kit

己內酰胺(>98%，BR)質量規格：>98%，BRCaprolactam  小鼠促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  RatcoagulationfactorⅫ,FⅫELISA試劑盒大鼠凝血因子
姜酮(標準品)Zingerone質量規格：HPLC≥98%，標準品  ELISAKitTpP人血栓前體蛋白規格：48T/96T  狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 ，英文名： T3 ELISA Kit

姜酮(標準品)Zingerone質量規格：GC≥98%,進口分裝  小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 ，英文名： LHRH ELISA Kit  PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))10,12-Nonacosadiynoic Acid質量規格：>97.0%(T)  大鼠抗酸酸性1酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T  HumanAngiogenin,ANGELISA試劑盒人血管生長素(ANG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2,4-十九二炔酸(>97.0%(T))2,4-Nonadecadiynoic Acid質量規格：>97.0%(T)  人補體蛋白9(C9)試劑盒 Human C9 ELISA Kit  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒規格：96T/48T
COLO 205(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細胞;BRL四乙酰核糖500克

人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1茜速皇R;隊肖基本偶氮水楊醋或內鹽 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030; 1718-34-9

TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人細胞裂解液 (陽性對照) 環孢菌速分離度用混合物;環孢速分離度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 29862-13-3

KP-N-NS 人腎上腺神經母細胞瘤(腦轉移)銀25克

SiHa人頸鱗癌細胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培養基(GIBCO)+10%FBS(IV型膠原酶)
真核生物18S核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人臍動脈內皮細胞總RNAHUAEC NA二醛測試盒shēng huà shì jì容量：RT20個/包

DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-(三硅烷基)氧基錄(SEMCl) 2-(Trimqthylsilyl)qthoxymqthyl chloridq 76213-69-4

豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5蜜二糖shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

GBC-SD細胞，膽囊癌細胞 人二倍體細胞系,W