一氧化氮NO含量測定試劑盒一步法

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-溴芴(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)2-Bromofluorene

人正常前列腺上皮細胞;RWPE-12-溴-9-芴酮(>96.0%(GC))質量規格：>96.0%(GC)2-Bromo-9-fluorenone

人肺動脈內皮細胞(HPAEC) ( 5×105 )2-溴-9,9-二芴(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)2-Bromo-9,9-dimethylfluorene

CL-0333E.G7-OVA(小鼠T瘤細胞)5×106cells/瓶×22,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))質量規格：>98.0%(HPLC)2,7-Diaminofluorene

人導管癌細胞;HCC38 大鼠關節軟骨細胞*培養基 100mL9-溴-10-苯基蒽(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)9-Bromo-10-phenylanthracene
DLD-1人結直腸腺癌上皮細胞 DLD-1 human colorectal cancer cell line 1640+10% FBSCOLUMNREGENERATIONKIT柱再生試劑01kitRT

CD40LG Protein Mouse 重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)醋-2-丁氧基酯 2-Butoxyqthyl ccqtctq 11-07-

人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) EC109，人食管癌細胞 HumanL-脯酸鹽酸鹽5克RT，避光

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0901透析袋27DM,34MDLC200u保存：-20℃

人齒齦成纖維細胞 (HGF)( 5×105 ).3-二錄-5.6-二清對本醌2,3-Dichloro-5,6-7iyeno-1,4-benzoinoneone
山羊皮膚細胞;WGS1齊墩果酸Oleanolic acid質量規格：HPLC≥95%，BR

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 齊墩果酸(高98%）Oleanolic acid質量規格：HPLC≥98%，BR

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×2齊墩果酸(標準品）Oleanolic acid質量規格：HPLC≥98%,標準品

HGC-27人胃癌細胞 細胞，HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞)莽草酸Shikimic acid質量規格：≥98%,BR

人小細胞肺癌;NCI-H2227莽草酸(標準品)Shikimic acid質量規格：HPLC≥98%，標準品
一氧化氮NO含量測定試劑盒一步法CD40LG Protein Mouse 重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)硫酸慶大霉素(標準品)質量規格：含量測定Gentamicin sulfate

人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) EC109，人食管癌細胞 Human頭孢呋辛鈉質量規格：>855ug/MG,USP30Cefuroxime 

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0901瑞舒伐他汀/羅蘇伐他汀游離酸質量規格：>97%,游離酸Rosuvastatin

人齒齦成纖維細胞 (HGF)( 5×105 )蘇丹I/溶劑黃14質量規格：BS生物染色級Sudan I/Solvent Yellow 14

CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞)5×106cells/瓶×2蘇丹II/蘇丹2/溶劑橙7質量規格：BSSudan II /Solvent Orange 7

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