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多胺氧化酶(PAO)測試盒可見分光光度法

簡要描述:多胺氧化酶(PAO)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:氯化鈉B肉湯基礎(SCPB) 英文名稱:Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g B(2.5萬單位) 英文名稱:Polymyxin B 產(chǎn)品規(guī)格:2.5萬單位/支*5 慶大瓊脂 英文名稱:Gentamycin Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 我妻氏培養(yǎng)基基礎 英文名稱:Wagstsuma

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質:經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:963

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

多胺氧化酶(PAO)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6473

商品介紹:

測定意義:

多胺氧化酶是催化生物體內多胺氧化的關鍵酶,通過調節(jié)體內多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應和生長發(fā)育過程。

測定原理:

PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫,在過氧化氫酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。

需自備的儀器和用品:

分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pDsRed-Nuc pDsRed-Nuc 低溫運輸,-20℃保存

50次 真菌RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存

25g  Silver Nitrate 室溫干燥避光保存

50T 血清型耶爾森氏菌ail基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)  低溫運輸,-20℃保存

200 mL 人胰島細胞分離液1.056 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.4  HEPES Buffer,0.5M,pH7.4  常溫保存

1mL 綠如藍染料,PCR級 DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存

2 ug pLenti6/UbC/V5-DEST pLenti6/UbC/V5-DEST 低溫運輸,-20℃保存

固氮根瘤菌培養(yǎng)基 Nitrogen-fixing Rhizobium medium 250g

1瓶 MG-63細胞株 MG-63 低溫運輸和保存

瓊脂培養(yǎng)基O Agar medium O(Baird-Parker agar) 250g

多胺氧化酶(PAO)測試盒可見分光光度法BIN3  細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 規(guī)格: 0.2mlFbxW2  FbxW2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

sLOX 1  可溶性凝集素樣氧化脂蛋白受體1抗體 規(guī)格: 0.2mlTORC1/CRTC1  環(huán)苷酸應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/Bio  標記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Plakophilin 2  橋粒斑菲素蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

MAP1A  微管相關蛋白1A抗體 規(guī)格: 0.1ml

C17orf77  17號染色體開放閱讀框77抗體 規(guī)格: 0.2ml

DIAPH1  耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

PADI4  關節(jié)相關基因抗體 規(guī)格: 0.2ml

ETBR/Endothelin B Receptor  內皮素B受體抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/AP  堿性磷酸(AP)標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

PCDHA1  原鈣粘附蛋白α1抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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