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酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

簡要描述:酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:胰酪胨大豆肉湯基礎(chǔ) 英文名稱:Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 改良V-P培養(yǎng)基 英文名稱:V-P Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 酪

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:1246

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

BK-01S6543

商品介紹:

測定意義:

ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。

測定原理:

在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成,4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

酵母浸粉 Yeast Extract Powder 250g

1瓶 SMC細胞株 SMC 低溫運輸和保存

7.5%氯化鈉肉湯培養(yǎng)基(2015藥典)  250g

50g Fluorescein Sodium Salt 室溫保存

50T 登革熱病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

25g L- 谷鈉 L-Glutamate Sodium    室溫保存

2 ug pKD4 pKD4 低溫運輸,-20℃保存

季銨鹽類中和劑管  9ml*20

1瓶 MCF-7/Adr細胞株 MCF-7/Adr 低溫運輸和保存

胰化大豆堅固綠瓊脂  250g

100mg 核糖核酸 B Ribonuclease B 4℃保存

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法Rabbit anti-chicken IgM whole serum  兔抗雞IgM抗清 規(guī)格: 1mlDPOLA/DNA polymerase alpha  DNA聚合α抗體 規(guī)格: 0.2ml

ARA24  雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM/Cy3  Cy3標記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

CCDC138  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體 規(guī)格: 0.2mlAQP8/Aquaporin 8  水通道蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ITGB3(Tyr773)  磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1mlExportin 1/CRM1  染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體 0.1ml

THSD1  小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-HNF4 (Ser304)  磷酸化肝細胞核因子4α抗體 規(guī)格: 0.1ml

IL-31RA/CRL3  白介素31受體a抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1166)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlOPN/BSP  骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1) 規(guī)格: 0.1ml

Acetyl-Histone H4(K8)  乙?;M蛋白H4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198)  磷酸化苷單磷酸活化蛋白激α1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD161c/NK1.1  CD161抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

CNKSR3  Ras激抑制因子連接增強蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

MMP-26  基質(zhì)金屬蛋白-26抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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