轉氫酶2測試盒紫外分光光度法

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：轉氫酶2測試盒紫外分光光度法

產品規格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

產品貨號：BK-01S6568

產品分類：氧化磷酸化系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

50次 DNA電泳分子量標準 (300-5000) DNAMETER（2） 4℃保存

2 ug pACT-Myd pACT-Myd 低溫運輸，-20℃保存

抗生素檢定培養基3號 Antibiotic Agar NO.3 250g

1瓶 CTLL-2細胞株 CTLL-2 低溫運輸和保存

GVPC瓊脂平板（9cm） GVPC Agar Base 10個/包

300U 蝦堿性 Shrimp Alkaline Phosphatase  -20℃保存

250mL PIPES Buffer，1.0M, pH7.5  PIPES Buffer，1.0M, pH7.5  常溫保存

1mL 溶液,100mg/mL Actidione Solution -20℃保存

2 ug pPICZα FC pPICZα FC 低溫運輸，-20℃保存

膽汁七葉苷瓊脂  2ml*20支

2 ug pBV 222 pBV 222 低溫運輸，-20℃保存

轉氫酶2測試盒紫外分光光度法DOK5/IRS6  胞漿接蛋白Dok5抗體 規格: 0.2ml

DICER1/Dicer  核糖核酸Dicer抗體 規格: 0.1ml

eIF4E  真核翻譯起始因子4E抗體 規格: 0.1ml

Nucleoprotein/NP  A型毒核蛋白抗體 規格: 0.2ml

ADAM15  去整合素樣金屬蛋白15抗體 規格: 0.1ml

Socs 2  細胞因子信號傳導抑制蛋白2抗體 規格: 0.1ml

CPT1A  肉毒堿棕櫚酰基轉移1A抗體 規格: 0.1ml

APOH  載脂蛋白H抗體 規格: 0.1ml

PRDX1  過氧化還原1抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Beta-Catenin(Ser45)  磷酸化β 連環素蛋白抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗羊IgM 規格: 0.1ml

phospho-TERT(Ser1125)  磷酸化端粒逆轉錄抗體 規格: 0.1ml 

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。