核固紅

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

HVMF Pellet 人類絨毛間質(zhì)成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦血管平滑肌細胞裂解物HBVSMCLAmberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)質(zhì)量規(guī)格：粒徑0.350 - 0.600 mmAmberlite® XAD1180N

CL-0226SW626(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2嘧菌酯（標準品）質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Azoxystrobin

FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙甲脒標準溶液（10μg/ml,u=4%）質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%Amitraz solution

人牙齦成纖維細胞cDNAHGF cDNA雙甲脒標準溶液（100μg/ml,u=2%）質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%Amitraz solution

豬胚胎傳代細胞;ST 子細胞，SiHa細胞 B22細胞，KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株Amberlite XAD7HP 離子交換樹脂(Mesh 20-60)質(zhì)量規(guī)格：Mesh 20-60Amberlite® XAD7HP
PIEC(豬髖動脈內(nèi)皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2泛酸鈣一水合物(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品(+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate

Promocell C-28025 Endothelial Progenitor Medium, 內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml山梨酸鉀(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Potassium sorbate

大鼠雪旺細胞;RSC96柚皮素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標準品Naringenin

CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 柚皮素質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%Naringenin

T-109A彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL藥根堿(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標準品Jatrorrhizine
人腎系膜細胞總RNAHRMC NADL-纈酸容量：25克

CD8A Others Ferret 雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 人細胞裂解液 (陽性對照) 4，4-二安基二本砜 4,4'-Dicminodiphqnylsulfonq 80-08-0

NCI-H520 人肺鱗癌細胞BOC-L-亮酸容量：5克

CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2potewwiumplatinicchloride錄化鉑鉀1克色譜標準品，99.5%

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓98-89-5環(huán)己Cyclohexanecarboxylic acid
核固紅tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1氯前列醇鈉(D型）D-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯前列醇鈉(DL型）DL-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP34

人星形膠質(zhì)細胞HA鹽酸川芎嗪(標準品)Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸川芎嗪Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

狗腎細胞隆突型;MDCK superdome頭孢氨芐Cephalexin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,一水合物

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