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濾紙酶測試盒可見分光光度法

簡要描述:濾紙酶測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:衛(wèi)矛醇半固體 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 醇發(fā)酵管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 丙二酸鹽 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 水楊苷發(fā)酵管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:532

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:濾紙酶測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6762

產(chǎn)品分類:糖代謝系列
商品介紹:

測定意義:

纖維素酶是由微生物產(chǎn)生的多組分的酶系,能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖,濾紙酶是其中的一個組分,研究濾紙酶活力對纖維素酶的研究具有非常重要的意義。

測定原理

濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在540nm處有最大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測定計算得濾紙酶的活力。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pOTB7 FKBPL pOTB7 FKBPL 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

3%NaCl雙水解  20支

2 ug pLVX-ZsGreen1-N1 pLVX-ZsGreen1-N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

柯氏尿素瓊脂  250g

3000U 谷脫氫 GLDH   -20℃保存

50T 壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

300µL 山羊抗兔IgG(H+L),辣根過氧化物標(biāo)記 Goat Anti-Rabbit IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存

250mL Alsever’s Solution  Alsever’s Solution  常溫保存

10mL DNA洗脫液2.0  

2 ug pFAST III pFAST III 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 Rose Bengal Agar Medium 250g

濾紙酶測試盒可見分光光度法GLT8D1  糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體 規(guī)格: 0.2ml

AQP2  水通道蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Nitrotyrosine  硝基酪抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-PAK1(Thr423)/PAK2 (Thr402)  磷酸化p21激活激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/FITC  FITC標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

CK18  細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1ml

COL6A5/Collagen VI alpha 5  6型膠原蛋白α5抗體 規(guī)格: 0.2ml

BEND3  BEND3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

MCP-3/CCL7  單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

ELAVL1/HuR  ELAVL1抗體 規(guī)格: 0.2ml

SHPRH  組蛋白連接作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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