三日瘧原蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

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大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠流行性出血熱抗體（EHF-Ab）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷脂酶A2(PLA-2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶（pACCase）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

三日瘧原蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書CWF19L1蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CWF19L1

磷酸化cyclin D1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Phospho-Cyclin D1 (Thr286)

2號(hào)染色體開放閱讀框84抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C2orf84

1號(hào)染色體開放閱讀框135抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C1orf135

羧酸酯酶3抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CES3

醌氧化還原酶樣蛋白1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CRYZL1

葉綠體蛋白酶抗體（植物） 規(guī)格： 1ml  英文名稱：Chloroplast protease

CSMD3蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CSMD3

20號(hào)染色體開放閱讀框196抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C20orf196

CD68抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CD68

細(xì)胞表面趨化因子受體2B抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CCR-2B

2號(hào)染色體開放閱讀框25抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C2ORF25

乳癌標(biāo)志物CHMP2A抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CHMP2A

膽堿/乙醇胺磷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CEPT1

9號(hào)染色體開放閱讀框172抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C9orf172