埃可病毒PCR檢測試劑盒說明書

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

棕櫚酸 CAS 21096 *  規(guī)格： 20mg

銀鍛苷 CAS 20316-62-5 *  規(guī)格： 20mg

異烏藥內(nèi)酯 CAS 728-61-0 *  規(guī)格： 20mg

五味子醇甲 CAS 7432-28-2 *  規(guī)格： 20mg

商陸皂苷甲 CAS 65497-07-6 *  規(guī)格： 20mg

25-甲氧基-原人參三醇 CAS  *  規(guī)格： 10mg

榿木 CAS 33457-62-4 *  規(guī)格： 20mg

泊金丁 CAS 94-26-8 *  規(guī)格： 20mg

甾醇 CAS 57-87-4 *  規(guī)格： 20mg

去甲澤拉木醛 CAS 107316-88-1 *  規(guī)格： 20mg

姜 CAS 122-48-5 *  規(guī)格： 20mg

環(huán)氧澤瀉烯 CAS 87701-68-6 *  規(guī)格： 20mg

瓜子金皂苷己 CAS  *  規(guī)格： 20mg

番瀉苷D CAS 37271-17-3 *  規(guī)格： 10mg

莪術(shù)烯 CAS  *  規(guī)格： 20mg

埃可病毒PCR檢測試劑盒說明書氟氫鉀  78.1  Potassium fluoride*：7789-29-9分子量： KHF2

2-溴甲醚  187.03  2- bromo ether*：578-57-4分子量： C7H7BrO

2-溴-4--5-嘧  199.01  2- bromo -4- amino -5- cyano pyrimidine*：94741-70-5分子量： C5H3BrN4

2--3,6-二氟-4-(三氟甲)吡  198.09  2- -3,6- two -4- (three f)*：675602-89-8分子量： C6H3F5N2

酞菁鎂(II)  Magnesium phthalocyanine (II)  536.84分子量： C32H16MgN8*：1661-03-6

二氯酞菁錫(IV)  Two tin phthalocyanine tin (IV)  702.15分子量： C32H16Cl2N8Sn*：18253-54-8

氯聚乙  Chlorinated polyethylene  分子量：*：63231-66-3

4-(二甲)吡-N-氧物水合物  138.17  4- (two a) pyridine -N- oxide hydrate*：1005-31-8分子量： C7H10N2O·xH2O

3-喹啉  144.17  3- amino group*：580-17-6分子量： C9H8N2

2,5-雙(1-萘)-1,3,4-惡二唑  322.36  Double 2,5- (1- naphthyl) -1,3,4- two with evil*：905-62-4分子量： C22H14N2O

4-氯甲聯(lián)  202.68  4- Cl*：1667-11-4分子量： C13H11Cl